prikaz prve stranice dokumenta Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
Pristup korisnicima matične ustanove
završni rad
Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
2017. urn:nbn:hr:193:076512
Mihalić, Andrea
Sveučilište u Rijeci
Fakultet biotehnologije i razvoja lijekova

Citirajte ovaj rad

Mihalić, A. (2017). Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A (Završni rad). Rijeka: Sveučilište u Rijeci. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, Andrea. "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A." Završni rad, Sveučilište u Rijeci, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, Andrea. "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A." Završni rad, Sveučilište u Rijeci, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, A. (2017). 'Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A', Završni rad, Sveučilište u Rijeci, citirano: 31.10.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić A. Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A [Završni rad]. Rijeka: Sveučilište u Rijeci; 2017 [pristupljeno 31.10.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

A. Mihalić, "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A", Završni rad, Sveučilište u Rijeci, Rijeka, 2017. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512
Prijavite se u repozitorij kako biste mogli spremiti objekt u svoju listu.
Podaci o radu
NaslovNovi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
AutorAndrea Mihalić
MentorAntonija Jurak Begonja (mentor)
Član povjerenstvaIvana Munitić (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaElitza Petkova Markova - Car (član povjerenstva)
Član povjerenstvaAntonija Jurak Begonja (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Rijeci
(Fakultet biotehnologije i razvoja lijekova)
Rijeka
Datum i država obrane2017-09-07, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		BIOTEHNIČKE ZNANOSTI
Biotehnologija
Sažetak
Fosfoinozitidi su skupina unutarstaničnih fosfolipida, koji nastaju iz fosfatidilinozitola (PI) djelovanjem brojnih kinaza i fosfataza. Iako su unutar stanice zastupljeni u maloj količini, njihova metabolička aktivnost ukazuje na veliki biološki značaj u regulaciji staničnih procesa i staničnoj signalizaciji. U ovom radu smo pratili fosfoinozitid 3-fosfat (PI3P), te njegov utjecaj na signalni put cAMP/protein kinazu A (PKA) u staničnoj liniji DAMI, stanicama ranog razvojnog stadija megakariocita. Glavni enzim koji producira većinu PI3P u stanicama je Vps34 kinaza (fosfatidil inozitol 3-protein kinaza klase III). PI3P smo u stanicama pratili transficiranjem DAMI stanica sa zelenim fluorescentnim proteinom fuzioniranim na 2xFYVE domenu (GFP2xFYVE) fluorescentnom mikroskopijom. Prisustvo zelenih vezikula odražavalo je lokalizaciju i prisustvo PI3P u DAMI stanicama. Imunofluorescencijom smo u stanicama pratili i lokalizaciju PKA regulatorne I podjedinice (RI), te smo utvrdili djelomičnu kolokalizaciju PI3P i PKA- RI. DAMI stanice koje eksprimiraju GFP-2xFYVE korištene su kao model praćenja inhibicije Vps34 kinaze, te smo ispitali učinak inhibitora ove kinaze (SAR405) na izgled i lokalizaciju zelenih vezikula PI3P u različitim vremenima. U konačnici, ispitali smo učinak inhibicije Vps34 kinaze i nedostatka PI3P na aktivnost PKA prateći raznu fosforilacije VASP na serinu 239 i 157, citoskeletnog supstrata PKA koji odražava njenu aktivnost. Na temelju dobivenih rezultata utvrdili smo kako postoji interakcija signalnog puta PI3P i PKA u megakariocitičnoj staničnoj liniji DAMI, te se otvaraju nova područja istraživanja kako bi se otkrio značaj i važnost ove nove interakcije.
Sažetak (engleski)
Phosphoinositides are a group of intracellular phospholipids, synthesized from phosphatidylinositol (PI) by a number of kinases and phosphatases. Although phosphoinositides are present in small amounts in cells, their high metabolic activity indicates a great biological significance in cellular regulation and signaling. This study focuses on phosphoinositide 3-monophosphate (PI3P), and its role in the cAMP / PKA signaling pathway in the cell line DAMI, that represents early stages of megakaryocyte development. The main enzyme that produces the majority of PI3P in the cells is Vps34 kinase (phosphatidyl inositol 3-protein kinase class III). Here PI3P was monitored by transfecting DAMI cells with green fluorescent protein fused with 2xFYVE domain (GFP2xFYVE) and by fluorescence microscopy. The appearance of green vesicles reflected the localization and presence of PI3P in DAMI cells. The location of PKA regulatory subunit (RI) was determined in cells by immunofluorescence, and it partialy colocalized with PI3P. DAMI cells expressing GFP-2xFYVE were used as a model for monitoring Vps34 kinase inhibition and we tested the effect of Vps34 kinase inhibitor, SAR405 on appearance and localization of vesicles at different times. Finally, we tested the effect of inhibition of Vps34 kinase on PKA activity, monitoring phosphorylation of VASP on serine 239 and 157, the cytoskeletal substrate of PKA that reflects its activity. Based on the results obtained, we determined an interaction of PI3P and PKA signaling pathways in the DAMI cell line. This opens up new area of research to reveal the significance and importance of newly found interaction.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:193:076512
Studijski programNaziv: Biotehnologija i istraživanje lijekova
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: preddiplomski
Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica biotehnologije i istraživanja lijekova (univ. bacc. biotechn. et pharm. inv.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaPristup korisnicima matične ustanove
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2017-11-03 12:01:37