The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway

Peradinović, Josip

prikaz prve stranice dokumenta The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway

Rad dostupan nakon 2030-08-26

diplomski rad

The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway

2020. urn:nbn:hr:193:742363

Peradinović, Josip

Sveučilište u Rijeci
Fakultet biotehnologije i razvoja lijekova

Citirajte ovaj rad

APA 6th Edition

Peradinović, J. (2020). The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway (Diplomski rad). Rijeka: Sveučilište u Rijeci. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

MLA 8th Edition

Peradinović, Josip. "The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway." Diplomski rad, Sveučilište u Rijeci, 2020. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

Chicago 17th Edition

Harvard

Peradinović, J. (2020). 'The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway', Diplomski rad, Sveučilište u Rijeci, citirano: 18.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

Vancouver

Peradinović J. The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway [Diplomski rad]. Rijeka: Sveučilište u Rijeci; 2020 [pristupljeno 18.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

IEEE

J. Peradinović, "The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway", Diplomski rad, Sveučilište u Rijeci, Rijeka, 2020. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:742363

Prijavite se u repozitorij kako biste mogli spremiti objekt u svoju listu.

Podaci o radu

Naslov	The cell-specific role of optineurin in TLR4- and ER stress-mediated activation of the NF-κB pathway
Naslov (hrvatski)	Stanično-specifična uloga optineurina u TLR4 ili ER stresom posredovanoj aktivaciji NF-κB puta
Autor	Josip Peradinović
Mentor	Ivana Munitić (mentor)
Mentor	Jelena Ban (komentor)
Član povjerenstva	Antonija Jurak Begonja (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstva	Rozi Andretić Waldowski (član povjerenstva)
Član povjerenstva	Ivana Munitić (član povjerenstva)
Član povjerenstva	Jelena Ban (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj	Sveučilište u Rijeci (Fakultet biotehnologije i razvoja lijekova) Rijeka
Datum i država obrane	2020-08-26, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana	BIOTEHNIČKE ZNANOSTI Biotehnologija
Sažetak	Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease, which leads to motor neuron death in the brain and the spinal cord. In 2010 the first optineurin mutations were found in the ALS patients, and the initial biochemical analyses in cell lines suggested that optineurin truncation or mutation in the ubiquitin binding region result in exaggerated nuclear factor κB (NF-κB) activation. Such excessive NF-κB activation and subsequent inflammation were reported to result in neuronal cell death. However, several follow-up studies in primary innate immune cells from optineurin deficiency or insufficiency models could not reproduce these findings. To further test this issue, we decided to induce NF-κB activation with paclitaxel [Toll-like receptor 4 (TLR4) agonist] and tunicamycin [endoplasmic reticulum (ER) stress inducer] to observe if optineurin will exert its role as a negative regulator. These stimuli could mimic some of the stresses that central nervous system (CNS) cells are exposed to during the neurodegenerative process. Microglial (BV2) and neuronal (N2A) optineurin wild-type (WT) and knock-out (KO) cells were used in this research. Optineurin KO BV2 cells exhibited a diminished p65 phosphorylation and TNF-α secretion upon paclitaxel treatment but stronger inhibitor of κB-α (IκB-α) degradation, while N2A KO cells exhibited slightly higher NF-κB activation as detected by p65 phosphorylation. Tunicamycin treated optineurin KO BV2 cells also revealed slightly higher IκB-α degradation and diminished p65 phosphorylation, but TNF-α secretion was not different. Notably, optineurin KO N2A cells also exhibited a slight tendency of stronger NF-κB activation as evidenced by p65 phosphorylation. Results obtained from N2A cells are in correlation with previous studies done on neuronal cell lines, while the ones obtained in BV2 cells differ from results done on primary microglia. Taken together, we propose that optineurin has cell-specific effects, acting as a negative regulator of NF-κB activation in BV2 and N2A cells in response to paclitaxel. It must be noted that these results are obtained in cell lines so they should be used as a preliminary information for subsequent studies on primary cells or in vivo models.
Sažetak (hrvatski)	Amiotrofična lateralna skleroza (ALS) je fatalna neurodegenerativna bolest koja dovodi do smrti motoričkih neurona u mozgu i leđnoj moždini. Prve mutacije optineurina pronađene su u pacijenata oboljelih od ALS-a 2010. godine. Prvotne biokemijske analize u staničnim linijama pokazale su da trunkacija ili mutacija ubikvitin vežuće regije optineurina dovodi do pojačane aktivacije puta nuklearnog čimbenika κB (NF-κB). Pretjerana NF-κB aktivacija te posljedična upala mogu dovesti do neuralne stanične smrti. Međutim, nekoliko studija napravljenih na primarnim stanicama urođene imunosti izoliranih iz modela deficijencije ili insuficijencije optineurina nisu mogle reproducirati rezultate dobivene na staničnim linijama. U svrhu ispitivanja tih kontradikcija, odlučili smo inducirati NF-κB aktivaciju s paklitakselom [agoinst receptora sličnom Toll-u (TLR4)] i tunikamicinom [izaziva stres endoplazmatskog retikuluma (ER)] kako bismo ispitali hoće li optineurin djelovati kao negativan regulator. Navedeni stimulusi mogu imitirati stresore kojem su stanice središnjeg živčanog sustava izložene prilikom procesa neurodegeneracije. U ovom istraživanju koristili smo migroglijalne (BV2) i neuronalne (N2A) stanične linije divljeg tipa (eng. wild-type, WT) i optineurin deficijentne (eng. knock-out, KO). BV2 KO stanice su pokazale smanjenu fosforilaciju p65 aktivaciju i sekreciju TNF-α, no jaču razgradnju inhibitora κB-α (IκB-α) nakon tretmana s paklitakselom. U N2A KO stanicama tretman paklitakselom rezultirao je blago pojačanom NF-κB aktivacijom što je zabilježeno fosforilacijom p65. BV2 KO stanice tretirane s tunikamicinom su pokazale jaču razgradnju IκB-α i smanjenu fosforilaciju p65, no razlika u izlučivanju TNF-α nije zabilježena. N2A KO stanice pokazale su tendenciju blago pojačane NF-κB aktivacije nakon tretmana tunikamicinom što je praćeno fosforilacijom p65. Rezultati dobiveni na N2A stanicama se slažu s prethodnim studijama provedenim na neuronalnim staničnim linijama. Međutim, rezultati dobiveni na BV2 stanicama se ne slažu s onim dobivenim na primarnoj mikrogliji. Uzimajući sve rezultate u obzir, predlažemo da optineurin ima stanično-specifični, te da ima potencijalnu ulogu kao negativan regulator NF-κB aktivacije u BV2 i N2A stanicama. Moralo bi se uzeti u obzir kako su ovi rezultati dobiveni iz staničnih linija te bi se pritom trebali koristiti kao preliminarna informacija za buduće studije koje bi se provele na primarnim stanicama ili u in vivo modelima.
Ključne riječi
Ključne riječi (hrvatski)
Jezik	engleski
URN:NBN	urn:nbn:hr:193:742363
Studijski program	Naziv: Biotehnologija u medicini Vrsta studija: sveučilišni Stupanj studija: diplomski Akademski / stručni naziv: magistar/magistra biotehnologije u medicini (mag. biotech. in med.)
Vrsta resursa	Tekst
Način izrade datoteke	Izvorno digitalna
Prava pristupa	Rad dostupan nakon Datum isteka embarga: 2030-08-26
Uvjeti korištenja
Datum i vrijeme pohrane	2020-08-27 08:56:32